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      常見問題

      細胞凍存液氮罐的具體操作步驟和細胞復蘇流程

      發布時間:2020-08-11 11:11:11 瀏覽:2605次

             細胞凍存液氮罐的具體操作步驟和細胞復蘇流程

        大量細胞如何儲存在液氮罐里,液氮罐里一般灌有低溫液氮,細胞的儲存需要低溫環境,放入-196度的液氮里對細胞是長期保存的一個適合的環境。細胞凍存液氮罐是將細胞存入液氮罐的液相里儲存,有專用的方形抽屜式提籃,2ml凍存管放入凍存盒然后再放入提籃后浸入液氮里,*浸入。使細胞*處于液氮-196度環境下,才能夠長期保存細胞。

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        細胞凍存液氮罐的具體操作步驟:

        1、培養皿或培養瓶中細胞按常規方法消化,或分離獲得原代細胞后,收集于離心管中。

        2、使用離心機離心,去除上清,收集細胞沉淀。

        3、根據細胞生長密度加入適量的LiveCyteTM細胞凍存液進行重懸,充分混勻。

        4、將細胞懸液分裝至凍存管中,直接放置于-80°C冰箱保存。24小時后可移入液氮長期保存(可選)。

        細胞凍存液氮罐的細胞復蘇流程:

        1、從-80°C冰箱或液氮罐中取出細胞。

        2、迅速放入37°C水浴,并不時搖動,在3分鐘之內使其*融化。

        3、在凍存管中加入少量*培養基,再將細胞混合液移入含有該細胞*培養基的離心管中,樣品和培養基比例為1:10,然后輕輕吹打,混合均勻。

        4、離心后去除上清,收集細胞沉淀。

        5、輕輕彈松細胞沉淀,加入適量培養液后接種于培養瓶或培養皿中,輕輕晃動使細胞分布均勻,置于37℃孵箱中培養。


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